使用方法及保养

实验实训一　光学显微镜的构造、使用方法及保养

显微镜是一种精密的光学仪器，是研究植物细胞结构、组织特征和器官构造的重要的不可取代的工具。我们必须很好地掌握显微镜的构造、使用方法及注意事项，并学会最起码的维修保养显微镜的知识，以延长它的使用时间。

一、实训目标与内容

（一）实训目标

了解显微镜的构造及其维护方法。

初步掌握显微镜的使用方法，明确使用中的注意事项。

（二）实训内容

光学显微镜的构造、使用与保养，观察各种切片。

二、实训材料

各种切片。

三、实训仪器

显微镜。

四、操作与观察

（一）显微镜的构造

光学显微镜是以可见光做光源，用玻璃制作透镜的显微镜。虽然显微镜种类很多，每一种又有若干型号，但其基本构造是一样的。（如图1-1为单筒光学显微镜，图1-2为双筒光学显微镜）

图1-1　单筒光学显微镜

1.目镜；2.镜筒；3.镜背；4.粗调节轮；5.细调节轮；6.物镜转换器；7.物镜；8.载物台；9.平台移动器；10.聚光器；11.虹彩光圈；12.反光镜

图1-2　双筒光学显微镜

1.目镜；2.物镜转换器；3.物镜；4.载物台；5.镜座；6.镜筒；7.镜臂；8.平台移动器；9.调节轮；10.聚光器

显微镜的构造可分为机械部分和光学系统。

1.机械部分

（1）镜座和镜柱：镜座为显微镜的底座，支持整个镜体，使之放置稳定。镜柱是镜座之上的短柱形物，支持镜体上部的各部分。

（2）镜臂：是镜柱上面的弓形部分，为手提之处，连接并支撑镜筒、载物台等机械部分。在单筒复式显微镜镜臂的下端与镜柱连接处有一活动关节，称倾斜关节，可使显微镜在一定的范围内后倾，便于观察。

（3）镜筒：是一中空的金属圆筒，其上端放置目镜，下端与物镜转换器相连，并使目镜和物镜的配合保持一定的距离。镜筒可借助镜臂上调节轮的作用，灵活地上下移动，用以调焦。

（4）物镜转换器：为一金属圆盘，位于镜筒下方，由两个凹面向上的金属圆盘构成。它可以转动，以更换不同放大倍数的物镜。

（5）载物台：为方形平台，是放置玻片标本的地方，台中央有一个圆形通光孔，光线由通光孔下方的反光镜反射上来。台上安装有推进器，它包括玻片夹和推进螺旋，既可固定标本，又可通过其螺旋，前后左右移动标本。

（6）调节器：可使镜筒或载物台升降，它装置在镜臂两侧，由粗细调节器组合在一起，大的为粗调节器，它的调节幅度较大，主要用于寻找目的物，使用低倍物镜观察材料时必须用它校准焦距；小的为细调节器，旋转它时镜台升降距离较小，能精准地对焦，使用高倍物镜观察材料时用它调焦。

2.光学部分

光学部分包括物镜、目镜、聚光器、反光镜等。物镜和目镜直接参与显微镜的成像，聚光器和反光镜起调节光强度及改变入射光的作用。

（1）目镜：也叫接目镜，安装在镜筒上端，其作用是将由物镜放大的物像进行再放大。一般目镜有数个，它的放大倍数分别是5×、7×、10×、15×等。

（2）物镜：也叫接物镜（或镜头），其功能是聚集来自标本的光线，使标本放大成一个倒立的实像。一般物镜的放大倍数都在镜头上注明：从3×到100×，常用的低倍镜为10×，高倍镜为40×，油镜头为100×。物镜是显微镜获得物像的主要部件，其作用为聚集来自光源的光线，利用入射光对被观察的物体进行第一次放大。

（3）聚光器：安装在载物台下，一般由2～3个凸透镜组成，上面的透镜是平面的。它的功用是收集从光源射来的平行光线，并汇集成光束，集中在一点，以增强照明度，再经过被检物体照射到物镜中去。

（4）虹彩光圈：装在聚光器之下，由许多金属片组成。调节操纵杆可以改变光圈的大小，调节光线的强弱。有的显微镜在载物台下安装有盘光阑，它是一个有数个口径大小不同并可转动的金属圆盘。它旋转时，可以调节下方反射来的光线强弱，以适于被检标本的要求。

（5）反光镜：安装在聚光器及虹彩光圈的下方。它可向各方向转动，它的作用是把光源射出的光线反射至聚光器或通光孔。它分平、凹两面，凹面镜有聚光作用，在光源微弱时使用，如光源充足则用平面镜。

（二）显微镜的使用方法和注意事项

1.取镜与放置

打开镜箱，从中取出显微镜。取镜时，用右手握住镜臂，左手托住镜座，使镜体保持直立，以防反光镜和目镜滑脱甩出。将显微镜轻轻放在实验台桌上，一般放在左侧，距离桌边3～4cm处，镜臂对向自己胸前，以便于观察。

2.清洁

检查显微镜是否有毛病，是否清洁，金属部分如有灰尘污垢，可用干净软布擦拭。透镜有污垢，要用擦镜纸擦拭，决不可用手帕擦，如有胶或黏污，可用少量二甲苯清洁。

3.对光

旋转物镜转换器，使低倍镜转向载物台，对准其中央的通光孔。在使用显微镜观察玻片标本之前，打开内置光源开关，调节好光源的亮度。

4.安装标本

将玻片标本放在载物台上，注意有盖玻片的一面一定朝上，否则用高倍镜观察时无法调焦，而且玻片标本易被损坏。然后用切片夹将玻片卡紧，转动平台移动器的螺旋，使欲观察的材料对准通光孔中央。

5.低倍镜观察

观察任何标本时，都必须先使用低倍镜，因为其视野大，易发现目标和确定要观察的部位。

观察时，首先按顺时针方向，向外旋转粗调节轮，两眼注视镜头，使载物台上升到距镜口约5mm处。接着一边从目镜向下观察，一边慢慢按逆时针方向，向内旋转粗调节轮，直到视野中被检物体清晰为止。若物镜已距标本过高，还看不到物像，则应检查被检物体是否在光轴线上，调整好后，重新调焦，直至物像出现和清晰为止。为了使物像更加清晰，此时可使用细调节轮，轻微转动到使物像最清楚为止。但切忌连续转动多圈，以免损坏仪器的精确度。当细调节轮转不动时，说明已升降至极限，不可硬拧，需重新调整粗调节轮，使物镜与标本间的距离稍微拉开，然后再旋转细调节轮直至物像清晰。

6.高倍镜观察

当物体需要进一步放大观察时，可进行高倍镜观察。

（1）用低倍镜调好焦距，物像清晰，将需观察的部位移至视野中央。

（2）小心转动物镜转换器，使高倍镜头对准载物台中央，这时物像大致仍在焦点，但并不十分准确，只需略微调动细调节轮，即可使物像清晰。用细调节轮时，只能向前或向外旋转半圈，不能超过180°；换成高倍镜后，经过调焦仍不能发现物像，应退回低倍镜，检查物像是否在视野中央，将物像移至中央后，再换高倍镜，调焦至物像清晰。因高倍镜的工作距离很短，操作时要十分仔细，以防镜头碰击玻片，尤其不可使用粗调节轮。

（3）可通过虹彩光圈或聚光器调节视野内光的强弱，求得反差清晰，形象清楚。

7.油镜的观察

在使用油浸镜头前，必须先用低倍镜找到被检物体，再用高倍镜调焦，待被检物体移至视野中央后，再换油镜观察。

使用油镜时，一定要先在盖玻片上滴加一滴香柏油（镜油），然后才能使用。

在用油镜观察标本时，绝对不允许使用粗调节轮，只能用细调节轮调焦。如盖玻片过厚，则不能聚焦，需重新调换，否则就会压碎玻片或损伤镜头。

油镜使用完毕，需立即用棉棒或擦镜纸蘸少许清洁剂，将镜头上残留的油迹擦去。否则待香柏油干燥后，很难擦净，且易损坏镜头。

8.显微镜使用后的整理

观察完毕，必须退回低倍镜，然后取下制片，切不可在高倍镜或油镜下取玻片。

放还显微镜之前，检查其是否清洁，擦拭干净后将镜头、镜臂、聚光器、反光镜退回原位，下降镜筒，放回镜箱内。

五、使用注意事项

显微镜是精密仪器，操作时动作要轻，不允许随便拆卸。如有故障，应及时报告指导教师处理。不同显微镜之间，不可随便调换目镜或物镜。

观察临时制片时，载物台要保持清洁，不要让玻片中的水分流到载物台上，更不能使酸、碱及其他化学药品与显微镜接触。

切换镜头一定要使用转换器，以免使光轴发生弯曲。

转动粗细调节器时，不要用力过猛，以防机件损坏，调节失灵。

在高倍镜下调节焦距时，切勿使用粗调节器，以免压坏标本，损坏物镜。

发现物镜或目镜不清洁时，要用擦镜纸做直线方向擦拭。切不可用手指、手帕、棉布等擦拭，以免划坏或黏污镜头。若镜头上有油污，可先用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭，然后再用干净擦镜纸擦拭。

高倍镜使用完毕后，必须先下降载物台，再取出玻片标本，以免取玻片时损坏镜头的镜面。

绝对禁止随意取出目镜或拆下显微镜的其他部件，以免灰尘掉入镜筒、部件失落或损坏。

六、作业与思考题

1.使用显微镜怎样对光？应特别注意哪几点？为什么？

2.使用高倍镜为什么必须用细调节轮调焦？