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巨噬细胞吞噬实验

时间:2022-05-13 理论教育 版权反馈
【摘要】:巨噬细胞可非特异性吞噬较大的颗粒性异物,如鸡红细胞、白色念珠菌等,称为大吞噬现象。本实验将鸡红细胞注入小鼠腹腔中,腹腔巨噬细胞可吞噬和消化鸡红细胞,一段时间后取出巨噬细胞观察吞噬现象,并计算其吞噬百分率和吞噬指数,以判定其吞噬活性。鸡红细胞是有细胞核的,镜下巨噬细胞的细胞核和鸡红细胞核均染成蓝色,巨噬细胞的细胞质呈浅红色。计数100个巨噬细胞,计算吞噬百分率和吞噬指数。

实验六 巨噬细胞吞噬实验

实验目的

观察巨噬细胞的大吞噬现象,了解巨噬细胞吞噬实验的操作方法。

实验原理

巨噬细胞可非特异性吞噬较大的颗粒性异物,如鸡红细胞、白色念珠菌等,称为大吞噬现象。本实验将鸡红细胞注入小鼠腹腔中,腹腔巨噬细胞可吞噬和消化鸡红细胞,一段时间后取出巨噬细胞观察吞噬现象,并计算其吞噬百分率和吞噬指数,以判定其吞噬活性。

实验材料

(1)1%鸡红细胞悬液:取肝素抗凝鸡血1mL,与生理盐水99mL混匀。

(2)6%可溶性淀粉肉汤:肉汤培养基100mL加入可溶性淀粉6g,经煮沸灭菌30 min。

(3)小白鼠1~2只。

(4)瑞氏染液、手术剪刀、镊子、显微镜等。

实验方法

(1)实验前3天,于小鼠腹腔内注射可溶性淀粉肉汤1mL。

(2)实验当天,于小鼠腹腔内再注射1%鸡红细胞悬液1mL。

(3)注射后30min,处死小鼠,取腹腔液涂片,冷风吹干,施行瑞氏染色。

(4)将染色后的涂片置于显微镜油镜下观察,绘图并记录。

实验结果

鸡红细胞是有细胞核的,镜下巨噬细胞的细胞核和鸡红细胞核均染成蓝色,巨噬细胞的细胞质呈浅红色。计数100个巨噬细胞,计算吞噬百分率和吞噬指数。

吞噬百分率=100个巨噬细胞中内含鸡红细胞的巨噬细胞数/100个巨噬细胞总数

吞噬指数=100个巨噬细胞吞噬的鸡红细胞总数/100个巨噬细胞总数

注意事项

(1)处死小鼠后立即注入生理盐水2mL,轻揉腹部,可获得较多的巨噬细胞。

(2)腹腔注射鸡红细胞后收集巨噬细胞的时间应预先摸索。时间过短则吞噬的鸡红细胞较少,时间过长则鸡红细胞易被消化。

思考题

检测巨噬细胞功能的方法还有哪些?各有什么特点?

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