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抗原和抗体有什么区别怎么区分

时间:2022-05-11 理论教育 版权反馈
【摘要】:放射免疫技术又称为竞争性饱和分析技术,是以放射性核素标记的抗原(Ag*)与反应系统中未标记的抗原竞争结合特异性抗体为基本原理测定待检样品中抗原量的一种分析技术。放射免疫技术灵敏、特异、简便易行、标本用样量少并且对仪器设备条件要求不高,因此广泛应用于生物医学检验,如激素、维生素、肿瘤标志物、药物等微量物质的检测。但存在放射污染的可能,且无法自动化分析,逐渐被非放射性免疫测定技术所取代。

一、放射免疫技术

放射免疫技术是以放射性核素为示踪物质的免疫标记技术。根据其方法学原理,主要可分为两种技术类型:

(一)放射免疫技术

放射免疫技术(radioimmunoassay,RIA)又称为竞争性饱和分析技术,是以放射性核素标记的抗原(Ag*)与反应系统中未标记的抗原(Ag)竞争结合特异性抗体为基本原理测定待检样品中抗原量的一种分析技术。当反应体系中Ag*和Ab的量恒定,且Ag*和Ag的总量大于Ab有效结合点时,则Ag*-Ab(B)生成量随着Ag量的增加而减少,游离的Ag*(F)量则随着Ag量的增加而增加。即待检Ag量与B成反比例关系,而与F成正比例关系(图6-19)。用已知不同浓度的抗原标准品得到相应的B值和F值,绘制标准曲线,在标准曲线上即可查找标本中的抗原含量。

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图6-19 RIA原理示意

(二)免疫放射技术

免疫放射技术(immunoradiometric assay,IRMA)是以放射性核素标记的过量抗体(Ab*)与待测抗原直接结合,采用固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争放射免疫分析技术。反应体系中Ag-Ab*复合物的放射性强度和待测抗原的量呈正相关。如以不同量的Ag标准品求出与Ag*-Ab放射性的量效关系,即可从测得的Ag*-Ab放射性求出待测样品的量。

根据抗原反应位点的不同,IRMA分为:

1.单位点IRMA技术 单位点IRMA技术中抗原只有一个反应位点,用过量的标记抗体与待测抗原反应,形成抗原-标记抗体复合物。反应平衡后,采集固相抗原,结合反应液中的游离标记抗体,测定放射性强度,强度与待测抗原的量成正比(图6-20)。该法的灵敏度和特异性均比较低,目前应用较少。

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图6-20 单位点IRMA原理示意

2.双位点IRMA技术 也称作双抗体夹心技术,采用固相抗体与标记抗体同时与待测抗原的两个反应位点结合,形成固相抗体-抗原-标记抗体复合物。待反应完成后,洗涤除去游离的标记抗体,测定固相上的放射性强度,其与待测抗原的量成正比(图6-21)。该技术大大提高了测定的灵敏度。

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图6-21 双位点IRMA原理示意

(三)RIA与IRMA主要特点的比较

RIA与IRMA的主要特点见表6-3。

表6-3 RIA与IRMA主要特点的比较

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(四)放射免疫技术的应用

放射免疫技术灵敏、特异、简便易行、标本用样量少并且对仪器设备条件要求不高,因此广泛应用于生物医学检验,如激素、维生素、肿瘤标志物、药物等微量物质的检测。但存在放射污染的可能,且无法自动化分析,逐渐被非放射性免疫测定技术所取代。

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