【摘要】：斑点免疫层析试验简称免疫层析试验，也以硝酸纤维素膜为载体，但利用了微孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，犹如层析一般。抗HCG免疫金复合物干片粘贴在近下端，抗HCG单克隆抗体和抗小鼠IgG抗体分别固化于NC膜的测试区和质控参照区。若标本中有HCG，可与抗HCG免疫金复合物结合。斑点免疫层析试验在试剂形式和操作步骤上较其他免疫测定法更为简化，只用一个试剂，只有一步操作。
实验36 斑点免疫层析实验
(dot immunochromatographic assay，DICA)
【目的】
熟悉斑点免疫层析试验的原理和方法。
【原理】
斑点免疫层析试验简称免疫层析试验(ICA)，也以硝酸纤维素膜为载体，但利用了微孔膜的毛细血管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，犹如层析一般。
抗HCG免疫金复合物干片粘贴在近下端，抗HCG单克隆抗体和抗小鼠IgG抗体分别固化于NC膜的测试区和质控参照区。当试纸条下端浸入液体标本中时，下端吸水材料即吸取液体向上端移动，流经干片时，使免疫金复合物复溶，并带动其向膜条渗移。若标本中有HCG，可与抗HCG免疫金复合物结合。此抗原-抗体复合物流至测试区时即被固相抗体所获，在膜上显出红色反应线条。
斑点免疫层析试验在试剂形式和操作步骤上较其他免疫测定法更为简化，只用一个试剂，只有一步操作。(图36-1)
【材料】
1.标本:孕妇尿。
2.“一步金法”早孕妊娠诊断试剂条片(有商品供应)。
3.尿液收集杯等。
【方法】
将试剂条下端标志部插入尿液中10s左右，取出后放平，置室温下3min，目测观察结果。
图36-1 免疫层析试验原理示意图
【结果】
若出现两条紫红色线为HCG阳性(妊娠)，若只出现质控参照线显示紫红色为阴性(未妊娠)。
【注意事项】
1.膜上既无反应线条，又无质控线条，表明检测错误，应重视。
2.强阳性尿液中HCG含量较多，因此质控线可能不出现或极浅淡，而仅在反应区显示淡紫色条带。应避免试纸条一端插入尿液过深或过浅，插入时间过长或过短也会影响试验结果。
【思考题】
试述斑点免疫层析试验的原理和应用。
免责声明：以上内容源自网络，版权归原作者所有，如有侵犯您的原创版权请告知，我们将尽快删除相关内容。
