实验11 人类ABO血型鉴定实验
(Identification of the human ABO blood group test)
【目的】
掌握人类ABO血型鉴定的方法和应用。
【原理】
人类ABO血型抗原有A和B两种。A型红细胞膜上有A抗原，B型红细胞上有B抗原，AB型有A和B两种抗原，而O型则不含有A和B抗原。据此，如分别将抗A和抗B血清与待测红细胞混合，抗A和/或抗B血清与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集，根据其凝集状况便可判定受试者的血型(表11-1)。
表11-1 血型鉴定实验结果与判定
“＋”表示凝集，“－”表示无凝集。
【材料】
1.酒精棉球、无菌采血针、毛细吸管、生理盐水、小试管中、无菌干棉球、凹玻片或载玻片、记号笔、巴氏吸管、牙签等。
2.抗A血清、抗B血清。
【方法】
1.用酒精棉球消毒无名指指端皮肤或耳垂，待酒精干后用无菌采血针刺破表皮，用毛细吸管取血1～2滴，放入含1m l生理盐水的小试管中，混匀，即成待检红细胞悬液(约2％)。取血后，应立即用无菌干棉球压迫针眼止血。
2.取凹玻片或载玻片一张，用记号笔画分为两格，并注明A、B字样。
3.用巴氏吸管吸取抗A血清、抗B血清各一滴分别滴于A、B格内(也可用2ml的一次性注射器代替巴氏吸管)。
4.另用巴氏吸管取待测5％红细胞悬液，于A格和B格内各加一滴。然后分别用牙签将抗血清与红细胞搅拌均匀(也可轻轻晃动载玻片以促其充分混匀)，以加速其反应。将玻片放置于实验台上静置数分钟后，在白色背景下观察凝集情况。
【结果】
如混合液由均匀红色混浊状逐渐变为澄清，并出现大小不等的红色凝集块者即为红细胞凝集;若混合液仍呈均匀混浊状，则表明红细胞未发生凝集。
如肉眼观察不够清楚，可将玻片置于显微镜下用低倍镜观察。
图11-1 人类ABO血型鉴定示意图
【注意事项】
1.试验用凹玻片或载玻片要清洁，注明A和B字样。
2.所用抗A、抗B血清必须在有效期内(注意试剂包装说明的有效期限)使用。
3.待检红细胞悬液不宜过稀或过浓。
4.要及时观察结果，以防时间过长使标本干涸而影响结果观察和判定。
【思考题】
1.人类ABO血型鉴定的基本原理是什么?
2.输血反应的发生机制及后果如何?
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