一、实验目的
1.学习家兔离体小肠平滑肌标本的制备与灌流方法。
2.观察消化道平滑肌的一般生理特性及药物对其舒缩活动的影响。
二、实验原理
哺乳动物的消化道平滑肌具有兴奋性、传导性和收缩性，这是与其他肌肉组织共有的特性，同时又具有自身的特点，即舒缩迟缓、富有伸展性、节律性、对电刺激不敏感，但对温度变化、化学药物和牵张具有较高的敏感性，受温度、药物和pH值的影响，其活动状态可发生改变。
三、实验对象
家兔。
四、实验器材
BL－420F生物机能实验系统、哺乳类动物手术器械1套、麦氏浴槽、张力换能器、兔台、铁支架、气泵、木槌、双凹夹、烧杯、加氧球胆、螺丝夹、培养皿、电热恒温水浴锅、注射器、棉线。
五、实验药品
1/10 000肾上腺素、1/10 000乙酰胆碱、1/10 000阿托品、1/100酚妥拉明、1mol/L NaOH溶液、1mol/L HCl溶液、1%CaCl2溶液、台氏液。
六、实验步骤和观察项目
1.灌流装置的准备与离体小肠平滑肌标本的制备
（1）灌流装置的准备 麦氏浴槽的进水口与恒温灌流装置的出水口相连，其出水口与恒温灌流装置的入水口相连，用37～38℃的自来水进行恒温灌流，浴槽内注入台氏液。将气泵与L型通气管相连，调节出气量，使气泡呈单个连续逸出。
（2）离体小肠标本制备 用木槌猛击家兔延髓部，待其昏迷后迅速切开腹腔，用手术线在胃与十二指肠分界处结扎。沿肠缘剪掉与十二指肠相连的肠系膜，沿结扎线下方近胃侧剪断小肠，并向下剪取长约20～30cm的一段肠管，迅速取出并置于4℃台氏液中轻轻漂洗，将肠内容物冲洗干净。将肠剪成长约2～3cm若干小段。
2.实验设备的连接
取一段长约2～3cm的肠段，用手术线分别将两端结扎，线的一端在浴槽底部L管的钩上，另一端与张力换能器相连，标本应位于浴槽中央，避免接触槽壁，调节线的松紧度，使其处于适度的紧张状态。将张力换能器与BL－420F生物机能实验系统相连，其输出信号再接入到电脑。打开电脑，在BL－420F生物机能实验系统主界面上的“输入信号”菜单下选择相应的信号采集通道，并选择信号的类型为“张力”。
3.实验观察
（1）记录一段正常状态下肠段运动曲线，主要将肠的运动频率、波形和幅度等方面的变化作为观察指标。
（2）用滴管吸取1/10 000乙酰胆碱，向浴槽内滴1～2滴，观察小肠平滑肌的收缩情况。观察完毕，从底部放流口放出台氏液，用38℃台氏液将标本反复冲洗3次，再换上新鲜的台氏液，待其收缩状态恢复到正常水平后方可进行下一步的实验。
（3）向浴槽内滴加1/10 000肾上腺素的1～2滴，观察其收缩反应。观察完毕，用“（2）”相同方法使其收缩恢复至正常水平。
（4）向浴槽内滴2～3滴1%的CaCl2溶液，如果效果显著，应迅速放流并用“（2）”相同方法冲洗。
（5）加1～2滴1mol/L HCl到浴槽，观察肠平滑肌收缩活动的改变。
（6）观察完“（5）”的实验结果基础上，滴2滴NaOH溶液到麦氏浴槽内，观察小肠平滑肌的反应，观察完毕迅速放流并用“（2）”相同方法冲洗。
（7）向浴槽内滴1/10 000的阿托品2～3滴，2min后，再加入1/10 000的乙酰胆碱1～2滴，观察其收缩活动，并与“（2）”的结果比较，观察完毕迅速放流并用“（2）”相同方法冲洗。
（8）向浴槽内中加入3～4滴1%酚妥拉明，观察其收缩活动，与“（3）”结果进行比较，观察完毕迅速放流并用“（2）”相同方法冲洗。
（9）把浴槽中台氏液全置换成温度为25℃的台氏液，观察小肠平滑肌的收缩情况，逐渐加温至38℃，再观察其收缩情况。
七、注意事项
1.注意连续向浴槽中的标本供氧，以保持标本活性。
2.注意保持标本的适度紧张，标本张力过大与过小，都会影响实验结果。游离及取出肠段时，动作要快，取兔肠及兔肠穿线时，尽可能不用金属及手指触及。
3.教材药量为参考剂量，如果效果不明显，可适当增补。
4.每个实验项目观察到明显效果后，应马上放掉台氏液，反复冲洗肠段3次，再次换上新鲜台氏液，等肠段活动稳定后，观察下一项目。
5.将水浴装置的温度保持在38℃，从而避免影响肠平滑肌的收缩及其对药物的反应。
6.加药液的注射器不能混用。
八、思考题
1.肠平滑肌有哪些受体，激动这些受体对肌肉收缩有什么影响？
2.各种药物引起小肠平滑肌活动差异的机制是什么？
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