膈神经放电

实验三　膈神经放电

一、实验目的

1.用电生理方法观察和记录在体情况下膈神经传出冲动的发放特征。

2.观察某些因素引起家兔在体膈神经发放群集性传出冲动的改变，从而加深对呼吸运动调节的认识。

二、实验原理

脑干呼吸中枢发放节律性冲动，通过支配呼吸肌的膈神经和肋间神经传至膈肌及肋间肌，从而产生节律性的呼吸运动。因此，用电生理方法记录膈神经放电活动情况可以作为观察呼吸中枢节律性活动的一项指标，本实验通过观察和记录膈神经放电情况，加深对呼吸运动调节的认识。

三、实验对象

家兔。

四、实验器材

兔常规手术器械1套、Y形气管插管、兔手术台、前置放大器、SBR－1型双线示波器、监听器、引导电极固定支架、双极引导电极、屏蔽导线、注射器、玻璃分针。

五、实验药品

20%氨基甲酸乙酯、医用液体石蜡、尼可刹米注射液。

六、实验步骤和观察项目

1.动物手术

（1）麻醉 家兔称重，耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯（1g/kg）。

（2）固定 用角膜反射和夹跖反射确认家兔麻醉成功后，背位固定于手术台上。

（3）气管插管 粗剪刀剪去颈前部兔毛，颈前正中做皮肤纵向切口，止血钳钝性分离皮下软组织和颈部肌肉，暴露气管，在环状软骨下方约1cm处做一“⊥”形剪口，将Y型气管插管向肺端插入，穿线并固定。

（4）分离双侧迷走神经 在与气管平行的左右血管神经鞘内，分离迷走神经，并穿线备用。手术完毕后用蘸有温热生理盐水的纱布覆盖手术野。

2.分离膈神经

以臂丛神经作为标记容易找到。兔膈神经由颈4和颈5脊神经的腹支汇合而成，分离颈部软组织，找到胸锁乳突肌和其外侧紧贴皮下的颈外静脉，在颈外静脉与胸锁乳突肌之间用止血钳向深处分离，直到颈椎旁，可见较粗的臂丛神经向后外方行走，在臂丛的内侧有一条较细的膈神经横过臂丛神经，并与之交叉，向后内侧行走。认清膈神经之后，用玻璃分针挑破浅筋膜，再向上分离1～2cm，穿线备用，然后滴加温热的液体石蜡，起保温、绝缘和防止神经干燥的作用，最后将膈神经钩在悬空的引导电极上，注意避免触及周围组织，以减少干扰。

3.连接实验装置

用玻璃分针把膈神经轻轻地安放在引导电极上，颈部皮肤接地，仪器参数：SBR－1型示波器，扫描速度为50～20ms/cm，整机灵敏度为50～20μV/cm。前放，高频滤波10kHz，时间常数0.1～0.01s。

4.观察项目

（1）记录正常的膈神经放电 示波器上呈现出周期性群集性放电，呈梭形，而且与吸气运动同步，监听器亦发出与之同步的拉锯样放电声，仔细观察放电活动、呼吸运动、监听器发出声音三者之间的关系。

（2）肺牵张反射时观察膈神经放电 在一侧气管套管的侧管上借助橡皮管连上20mL注射器，注射器内充20mL空气，在吸气末堵塞另一侧管，马上将注射器内空气迅速注入肺内，使肺维持扩张状态，此时呼吸运动及膈神经放电将暂时停止。在呼吸运动恢复后，开放堵塞口，呼吸运动平稳后，于呼气末堵塞套管的一支侧管，同时立即用注射器抽吸肺内气体20mL，使肺维持在萎缩状态，观察此时膈神经放电的变化。在呼吸运动恢复后，开放堵塞口，再观察一会儿膈神经放电的情况。

（3）尼可刹米对膈神经放电的影响 耳缘静脉注入稀释的尼可刹米1mL（50mg），观察膈神经放电以及呼吸运动的变化。

（4）迷走神经对膈神经放电的影响 剪断一侧迷走神经，观察膈神经放电和呼吸运动的变化；再剪断对侧迷走神经，观察膈神经放电和呼吸运动的变化。

七、注意事项

1.分离膈神经时，须小心剥离干净神经上的结缔组织。

2.电极首先放在膈神经的近外周端，若描记不出神经放电，可再把引导电极往中枢端移动。

3.每次处理前后应有对照，处理后应在神经放电基本恢复，呼吸运动平稳后再作下一步操作。

4.用注射器向肺内注气或抽气时，切勿过量，以免引起动物肺损伤或死亡。

八、思考题

1.如何设计实验证明膈神经是传入或传出神经？

2.膈神经放电与迷走神经之间有什么关系？