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准确的核酸检测点位置

时间:2022-05-04 理论教育 版权反馈
【摘要】:用氚稀释、中子激活、DXA等方法分别测定总体水、总体蛋白、总体矿物质、总体糖原,再从体重减去水、蛋白、矿物质、糖原,即可求得总体脂质,但目前尚无直接测定总体糖的方法。本法可测定脂肪、矿物质、瘦体组织。以BIA检测人体各间隙液体,而以DXA检测人体组织的各种成分,两者合用是一种很有前途的检测人体成分的方法。用于诊断的核素及其研究的器官已不少,现以31P及肌肉为例简述磁共振波谱检测法。d用以检测细胞内pH。

人体组成可以从整体、组织、器官、细胞、分子、原子各个层次进行分析。人体约有50种元素组成,其中9种元素O、C、H、H、Ca、P、K、Ha、Cl总计约占体重98%,这些均可检测,用延迟γ中子激活分析(delayed gamma neutron activation analysis)可检测O、C、Ha、Ca、P,用迅时γ中子激活分析(prompt gamma neutron activation analysis)可检测H、Cl、H,K可以整体计算,这些尚未能在临床普及应用。

(一)人体各种成分测定

1.蛋白 用迅时γ在体中子激活分析(IVHAA,in vivo neutron activation analysis)方法测定总体蛋白。

2.脂肪 一种测定方法是减差法(difference),另一是用双能X线吸收测定法(dual-energy x-ray absorptiometry,DXA)。

(1)减差法:

用氚稀释、中子激活、DXA等方法分别测定总体水、总体蛋白、总体矿物质、总体糖原,再从体重减去水、蛋白、矿物质、糖原,即可求得总体脂质,但目前尚无直接测定总体糖的方法。

(2)DXA:总体脂肪可用DXA测定。

3.矿物质 分为骨性及非骨性两类,骨性矿物质主要成分是钙羟磷灰石,这可用DXA测定;非骨性矿物质在成年男性总量约600g,这可以总体蛋白计算:

4.糖原 主要分布于肝脏及骨骼肌,成年男性总量约500g,其检测可用减差法。

总体脂质、蛋白、矿物质、水可以IVHAA、DXA、氚稀释等方法测定。

(二)人体细胞内外成分测定

1.体细胞质量(body cell mass,BCM) Moore曾提出细胞内钾与氮之比为3mmol K∶1g H(1mmol K∶1/3g H),细胞质量25%(1/4)由蛋白组成,故体细胞质量可由下式计算:

细胞外钾约占全身总钾量2%,可略而不计,故算式可简化成下式:

全身可交换钾可以42K示踪物稀释求得。

2.细胞外液体

(1)稀释法:正常人可用放射性硫酸盐、溴化物稀释法测定,但在危重外科创伤患者由于体液在各间隙剧烈变动,以及体液从各种途径大量丢失,以致应用本方法测定细胞外液发生困难。

(2)中子激活法:以激活中子轰击机体,求得总体氯以测定细胞外液。本法也可用于其他元素如氮,以测定瘦体组织变化。

(三)测定人体成分的一些方法

1.X线断层显像(CT) 可测定皮下组织及脂肪组织的量。

2.磁共振成像(MRI) 用以测量整体成分如脂肪。

3.全身衰变计数器(total body counters) 可测定机体存在核素如40K的自发衰变,这可反映瘦体组织状况,但这对重患者不合适,因患者需要在仪器内很长时间。

4.双能X线吸收法(DXA) 用恒定电位X线其能量12.5fJ并带有K型滤片(铈),以求得稳定双能的辐射一致的射线,其有效能量为6.4及11.2fJ。本法可测定脂肪、矿物质、瘦体组织。

5.多频率生物电阻抗分析(multifrequency bioelectrical impedance analysis,BIA) 人体大致由脂肪组织(水少,电阻高)及无脂组织(水、电解质多,导电好)组成,无脂组织可分为细胞质量及细胞间液,营养不良通常是细胞质量、脂肪组织减少和细胞间液增加。BIA原理是根据人体中电解质液可传导低压电流特点,通过电压、电流改变,测定电阻来计算人体组织的构成。单频(50k Hz)阻抗测定患者水分变化的结果尚有分歧,多频阻抗则以不同电流通过细胞内外间隙检测,可增加准确度,用以测定总体水、水分在各间隙分布以及脂肪组织和细胞质量。

6.双能X线吸收法与多频生物电阻抗合用(DXA/BIA) 可测量脂肪、骨性矿物质、瘦体组织、细胞外液、细胞内液、蛋白质、糖原及非骨性矿物质。实用,患者接收辐射量小。以BIA检测人体各间隙液体,而以DXA检测人体组织的各种成分,两者合用是一种很有前途的检测人体成分的方法。

7.磁共振波谱检测法(magnetic resonance spectroscopy,MRS) 可以无创性检测细胞及细胞器功能,研究细胞内变化及其生化、病理机制,目前应用本方法研究的组织器官有肌肉、肝脏、心、脑等,其反应常先于临床表现。

用于诊断的核素及其研究的器官已不少,现以31P及肌肉为例简述磁共振波谱检测法。成人瘦体组织重量1%由磷构成,在许多代谢过程中磷起重要作用,是核苷酸的主要成分,细胞膜磷脂极性基因的一部分。通常情况下,活组织DHA的磷及大多数磷脂不能被31P MRS所检测,因其浓度太低,且磷在这些化合物的迁移率小,以致信号扩大后失去分辨能力。

ATP通过ATP酶分解而为细胞作功提供能量,ATP不但由糖酵解、糖原分解及氧化磷酸化所提供,也可由含有高能磷酸盐化合物如磷酸肌酸分解所提供,这可由下列二式①、②表示之:

△:MRS可检测化合物

Pi:无机磷酸盐

PCr:磷酸肌酸

图8-1 鼠腓肠肌静息状态31P MRS波谱模式

图8-1示图,通常可发现5个主要峰,即ATP的三种磷酸盐的原子α-ATP、β-ATP、γ-ATP以及PCr、Pi,有时在Pi峰上还可见到PME(phosphomonoesters,磷酸单酯)峰,这是由糖酵解中间产物如6磷酸葡糖形成。d用以检测细胞内pH。

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