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抗双链抗体检测

时间:2022-04-14 理论教育 版权反馈
【摘要】:DNA作为自身抗原有若干决定簇,只有抗碱基对DNA的自身抗体,如抗dsDNA抗体、抗单链新折叠片段的自身抗体才与风湿性疾病有关。抗双链脱氧核糖核酸抗体又称天然DNA抗体,与系统性红斑狼疮的发病密切相关,其在细胞核的反应点位于DNA(外围区)的脱氧核糖核酸框架上。 抗dsDNA抗体是SLE的诊断标准之一,特异性>90%,且其效价随疾病的活动和缓解而升降,可用于监测SLE的病情变化及疗效。自身免疫病要结合临床流行病学及实验室资料来诊断。

DNA作为自身抗原有若干决定簇,只有抗碱基对DNA的自身抗体,如抗dsDNA抗体、抗单链新折叠片段的自身抗体才与风湿性疾病有关。抗双链脱氧核糖核酸(double-stranded DNA,ds-DNA)抗体又称天然DNA抗体,与系统性红斑狼疮的发病密切相关,其在细胞核的反应点位于DNA(外围区)的脱氧核糖核酸框架上。

【检测原理】 本试验是利用酶免疫斑点技术来检测抗体。抗原以分散的点状形式被固定在固相膜上,当标本的抗体与固定在测试条固相膜上的测定抗原结合后,去除非特异的结合物质,再加入结合有碱性磷酸酶的抗人抗体固定的人抗体进行反应,产生容易观察、明显的蓝紫色斑点。

【适应证】 可用于系统性红斑狼疮(SLE)和干燥综合征(SS)、进行性系统性硬化病(PSS)、多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)、混合性结缔组织病(MCTD)、类风湿关节炎(RA)等自身免疫疾病的诊断和鉴别诊断。

【标本类型】 血清。

【试验操作】

1.预备

(1)设置好恒温仪温度。

(2)放入反应管。

(3)在第一个反应管中加入2ml稀释液(1);在第二个反应管中加入2ml增强液(2);在第三个反应管中加入2ml结合液(3);在第四个反应管中加入2ml发展液(4)。

(4)预热10min。

2.试验步骤

(1)反应管中加入血清10μl。

(2)测试条在清洗杯中预湿30~60s。

(3)将测试条插入反应管1,混合,放置5min。

(4)取出测试条,放入清洗杯,来回运动5~10s。

(5)将测试条插入反应管2,混合,放置5min。

(6)取出测试条,放入清洗杯,来回运动5~10s。

(7)将测试条插入反应管3,混合,放置15min。

(8)取出测试条,放入清洗杯,来回运动5~10s后放置5min。

(9)将测试条插入反应管4,混合,放置5min。

(10)取出测试条,清洗杯中清洗,显色并干燥,判断。

【结果判读】

1.阳性 在膜孔中心可见一个清晰而且界限清楚的斑点,膜孔外的周边色必须是白色或灰白色的。

2.阴性 看不见显色斑点或斑点很浅不易看见

【参考范围】 阴性。

【临床意义】 抗dsDNA抗体是SLE的诊断标准之一,特异性>90%,且其效价随疾病的活动和缓解而升降(活动期SLE抗dsDNA抗体阳性率为80%~90%;非活动期<30%),可用于监测SLE的病情变化及疗效。

【局限性】 检测结果阴性不能排除自身免疫病。没有一个筛选试验能够包含所有可能的核抗原。自身免疫病要结合临床流行病学及实验室资料来诊断。

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