分子生物学技术

从分子水平检测病原体的核酸或蛋白，是近年来分子生物学技术发展给临床微生物检测方法带来的根本性变化。

聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）和核酸探针杂交技术可用于检测病原体的核酸。PCR技术是一种体外基因扩增技术，利用DNA聚合酶介导一系列循环反应，将病原体基因组DNA信号放大后，进行特异性检测。通常将PCR技术与核酸探针杂交技术结合起来，大大增强了检测的敏感性和特异性。实时荧光定量PCR技术（real-time PCR）是通过始点定量和荧光检测系统实时监测累积荧光强度而实现核酸定量的一种技术，具有全封闭单管扩增、灵敏度高、特异性强、线性关系好、操作简单、无扩增后处理步骤等优点，目前已经应用于对临床多种病原体的快速检测。

基因芯片技术（gene chip或DNA microarray）是将大量核酸片段以预先设计的方式固定在载玻片、尼龙膜和纤维素膜等载体上组成密集分子阵列，与荧光素或其他方式标记的样品进行杂交，通过检测杂交信号的强弱进而判断样品中靶分子的有无和数量。该技术具有高通量、自动化程度高、快速、样品用量少、灵敏度高、特异性强、污染少等特点，是未来感染性疾病快速诊断的重要手段。

蛋白质芯片（protein chips）是分析蛋白质的新技术。按特定排列方式在很小的表面积上集成多种蛋白质活性分子，可同时检测多种病原体相关的蛋白质抗原及抗体，具有快速、微量和高通量等特点。

利用分子生物学技术，不仅可以对目前尚不能或很难进行分离培养的微生物以及生长缓慢的病原体（如乙型肝炎病毒、沙眼衣原体、结核分枝杆菌）进行检测，以尽快得到病原学诊断的结果，同时还能进行耐药基因的检测，并对病原微生物进行基因分型（丙型肝炎病毒），以预测和检测抗感染治疗的效果。

目前，不少的商家正开发适用于不同检测目的的多种分子微生物检测试剂盒，以满足临床微生物学实验室的需要。总之，分子生物学技术将使临床微生物检测迈入更快、更准、更广的新时代。