【实验目的】
1．学习测定红细胞渗透脆性的方法。
2．加深对细胞外液渗透张力在维持红细胞正常形态与功能重要性方面的理解。
3．观察不同因素对红细胞渗透脆性的影响。
【实验原理】
将红细胞悬浮于等渗NaCl溶液中，其形态不变。若置于低渗NaCl溶液中则发生膨胀破裂，此现象称为红细胞渗透脆性。但红细胞对低渗盐溶液具有一定抵抗力，其大小可用NaCl溶液浓度的高低来表示。将血液滴入不同浓度的低渗NaCl溶液中，开始出现溶血现象的NaCl溶液浓度为该血液红细胞的最小抵抗力（正常为0．42%～0．46%NaCl溶液）。出现完全溶血现象时的NaCl溶液浓度为该红细胞的最大抵抗力（正常为0．28%～0．32%NaCl溶液）。前者代表红细胞的最大脆性（最小抵抗力），后者代表红细胞最小脆性（最大抵抗力）。生理学上将能使悬浮于其中的红细胞保持正常形态的溶液称为等张溶液，不能跨过细胞膜的微粒所形成的力，但等渗溶液并不一定是等张溶液（如1．9%的尿素溶液）。
【实验对象】
家兔。
【实验用品】
试管架，小试管10支，载玻片，盖玻片，注射器，8号注射针头，棉签，1%NaCl溶液，蒸馏水。
【实验步骤】
1．配制不同浓度的低渗NaCl溶液取口径相同的干洁小试管10支，分别编号排列在3个试管架上，按下表所示的配置方法和药物剂量，分别向各试管内加入1%NaCl溶液和蒸馏水，便配制好不同浓度的NaCl低渗盐溶液，每管总量均为2ml。不同浓度低渗氯化钠溶液的配制（表2－1）。
表2－1 不同浓度低渗氯化钠溶液的配制
2．采血并滴入试管 首先采用干燥的2ml注射器，从家兔的耳缘静脉采血。然后，向每一个试管滴入1滴血液，并用各试管的低渗NaCl溶液与血液充分混合，在室温下放置1h。
【观察项目】
1．观察不同浓度低渗NaCl混合液的颜色和透明度，以确定发生溶血时的NaCl溶液的浓度。
2．试管内液体有明确的颜色分层现象，即上层为近于无色或极淡红色，而下层为浑浊红色，表明红细胞没有溶解。
3．若试管内液体的上层出现透明红色，而下层为浑浊红色，表明部分红细胞破坏和溶解，为不完全溶血。注意观察开始出现不完全溶血的NaCl溶液浓度，即可确定为红细胞的最小渗透抵抗力，也即红细胞的最大渗透脆性。
4．若试管内液体完全变为透明色，表明红细胞完全破坏和溶解，即完全溶血。引起完全溶血的最低NaCl溶液浓度，即可确定红细胞的最大渗透抵抗力，也即红细胞的最小渗透脆性。
5．记录红细胞的渗透脆性范围，即开始出现不完全溶血的NaCl溶液浓度和完全溶血的最低NaCl溶液浓度。
【注意事项】
1．每支试管内血液滴入量应准确无误（只加1滴）。
2．确保每支试管NaCl溶液的浓度、容量准确。
3．小试管必须清洁、干燥。
4．观察结果时应以白色为背景。
【思考题】
1．为什么红细胞在等渗的尿素溶液中迅速发生溶血？
2．测定红细胞渗透脆性有何临床意义？
3．同一个体的不同红细胞的渗透脆性不一样，为什么？
（刘海云 陈秀琴）
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