【目的】 观察刺激迷走神经和静脉注射生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素等药物对尿量及尿液成分的影响，分析其作用机制，加深对尿生成过程及其调节机制的理解。
【原理】 尿液生成过程包括肾小球滤过、肾小管与集合管的重吸收和分泌，凡影响上述过程的因素都可引起尿量的改变。影响肾小球滤过的因素有：有效滤过压、滤过膜面积及其通透性和肾血浆流量。有效滤过压是肾小球滤过作用的动力，而有效滤过压的高低主要取决于肾小球毛细血管血压、血浆胶体渗透压和囊内压，其中任一因素发生变化均会影响有效滤过液，进而影响肾小球滤过率。滤过膜面积及其通透性在正常情况下保持稳定，但在肾小球肾炎等病理情况下，可因具有滤过功能的肾小球减少致滤过面积减少，因机械屏障和电学屏障作用破坏而致膜通透性增加。肾血流量的调节机制包括自身调节、神经调节和体液调节，当动脉血压在80～l80mmHg波动时，通过自身调节的作用可保持肾血流量的稳定，而交感神经兴奋、血液中去甲肾上腺素和血管紧张素等分泌增加可引起肾血管收缩，血流量减少。
重吸收和分泌的调节，由神经、体液和自身调节，尤其是体液调节来完成，参与体液调节的激素主要是血管升压素和醛固酮。另外，肾小管的重吸收有一定限度，如血糖浓度过高，超过肾糖阈，将出现糖尿，并由于小管液溶质浓度的增加，使小管液渗透压升高，水的重吸收减少，导致尿量增加，这种现象称为渗透性利尿。
【材料】 家兔；计算机生物信号处理仪，压力换能器，记滴器，兔手术台，哺乳动物手术器械，注射器（20、10、1ml各一副），膀胱插管，试管，试管夹，培养皿，酒精灯，丝线，棉绳，纱布，尿糖试纸；20%氨基甲酸乙酯，生理盐水，20%葡萄糖，1∶10 000去甲肾上腺素，垂体后叶素，呋塞米，0.6%酚红，10%NaOH。
【方法】
1.仪器连接和参数设置
（1）颈动脉血压测量记录装置详见第5章中综合实训项目二“影响家兔动脉血压的因素”。将血压换能器固定于铁支柱上，其位置应与心脏在同一平面。压力换能器输出线接计算机生物信号处理仪输入通道1。
（2）血压记录的参数设置同实验“影响家兔动脉血压的因素”。
①RM6240系统：压力换能器输入通道选择血压记录模式，时间常数为直流，滤波频率100Hz，灵敏度12kPa，采样频率800Hz，扫描速度500ms／div。连续单刺激方式，刺激强度5～10V，刺激波宽2ms，刺激频率30Hz。
②MedLab系统：压力换能器输入通道选择血压记录模式，通道放大倍数200、直流耦合（下限频率DC）、上限频率30Hz，采样间隔2ms；串刺激方式，波宽2ms，刺激强度5～10V，时程1s，频率30Hz。
（3）尿液记录：记滴器导线接至受滴插口。
以RM6240系统为例进行说明。在示波“菜单”中，选择“记滴功能”，弹出对话框（图8－1）。选择“开始记滴”按钮，在“开始时刻”对话框中系统自动记录这一时刻，并在“速率”框中自动显示当前尿滴的速率。此时“开始记滴”按钮变为“停止记滴”，需停止时，点此按钮。系统自动显示记滴时间、滴数和平均速率。记录波形，先“开始记录”，再“开始记滴”。
图8-1 记滴对话框
2.手术准备
（1）麻醉与固定：从兔耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯（4ml／kg体重）。待兔麻醉后，将其仰卧，固定四肢及兔头。
（2）颈部手术：剪去颈前部兔毛，正中切开皮肤（切口长度5～6cm），用止血钳或玻璃分针纵向分离软组织及颈部肌肉，暴露气管及与气管侧后方的右血管神经鞘，从血管神经鞘中仔细分离出迷走神经，并在神经下穿线备用。分离左侧颈总动脉，行颈动脉插管。静脉注射肝素，剂量为1 000U／kg体重。记录血压。
（3）腹部手术：从耻骨联合向上沿中线行长约4cm的切口，沿腹白线切开直至打开腹腔，将膀胱轻拉至腹壁外，辨认清楚膀胱和输尿管的解剖部后位，用线结扎膀胱颈以阻断膀胱与尿道的通路（注意：输尿管与膀胱间必须保持通畅）。用止血钳提起膀胱前壁，选择血管较少处，切一纵行小口，插入插管后用线结扎（图8-2）。如膀胱壁较松弛而膀胱容积仍较大时，可用粗线将膀胱扎掉一部分，使膀胱内的贮尿量减至最少。手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。
图8-2 膀胱插管
使插管的引流管出口处低于膀胱水平，引出的尿液应滴在记滴器的两个电极上，滴下的尿液用培养皿盛接。
【观察项目】
1.连续记录动脉血压。
2.记录正常尿流量（滴／分）。
3.静脉快速注射37～38℃的生理盐水20ml，观察并记录尿量变化。
4.结扎并剪断右侧迷走神经，用强度5～10V、频率30Hz、波宽2ms的电脉冲其末梢端0.5～2min，使血压降至40～50mmHg，观察并记录尿量变化。
5.静脉注射20%葡萄糖5ml，观察并记录尿量变化。于注射葡萄糖前后分别用尿糖试纸检测尿糖，观察有无尿糖。
6.静脉注射1∶10 000去甲肾上腺素0.5ml，观察并记录尿量变化。
7.静注注射呋塞米5mg／kg体重，观察并记录尿量变化。
8.静脉注射0.6%酚红0.5ml，用盛有10%NaOH溶液的培养皿收集尿液，计算从注射酚红起到尿中刚出现酚红所需的时间（酚红在碱性液中呈红色，可在培养皿下垫一白纸以便观察）。
9.静脉注射垂体后叶素2U，观察尿量变化。
【注意事项】
1.实验前多给家兔食用菜叶及水。
2.本实验需多次静脉注射，应注意保护兔耳缘静脉，静脉穿刺从远心端开始，逐次移向耳根。
3.行膀胱插管时，操作需轻柔，以免膀胱受刺激收缩，增加插管难度。
4.各项实验顺序的安排是：在尿流量增多的基础上进行减少尿生成的实验，在尿量少的基础上进行促进尿生成的实验。
思考题
1.本实验中哪些因素是通过肾小球滤过率而影响尿量的？它们各自的作用机制如何？
2.兔静脉注射20%葡萄糖5ml为什么会引起利尿？
3.凡使动脉血压升高的因素，是否均可引起尿量增加？
（陆佩蓓）
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