体腔液脱落细胞

【采集方法】　体腔液（包括胸腔积液、腹水、心包积液等）通常在无菌操作下，经针穿抽吸，收集于干净的容器内，直接送到实验室。估计为血性样本时，可预先在样本瓶内加入3～5U肝素以抗凝（不影响细胞形态）。若样本不能立即送检，可将样本加入适当固定液（一般可用甲醛原液与样本量1∶9的比例加入即可，或95%乙醇与样本量3∶7的比例加入），于冰箱4℃冷藏贮存，不超过24～72h。样本量少时应将样本全部送检；样本量多时，可取其中的200～500ml送检。一般而言，样本量宁多勿少，以备他用。

【制备方法】　理想的体腔液样本的涂片是细胞不退变，涂片上可诊断细胞成分丰富且单层平铺不重叠。因此，熟练掌握正确的制片方法很重要。一般制片程序如下。

1．取液　让送检液体在阴凉处静置15min左右，然后把上部液体轻轻倒掉，取下层液体分装两管各15～50ml。遇到含组织微粒的样本可充分用力振荡（目的是尽量打碎组织微粒）之后再进行前述步骤。若为胶冻样液体，须用力振荡，混合后取适量液体进行离心。

2．离心　以2　000r／min，离心5min。

3．观察沉淀物

（1）量多：离心后用吸管吸掉上清液，然后，用吸管吸取沉淀物上层细胞。

（2）量少：离心后肉眼只能看到少许沉淀，快速吸走上清液，再加入送检标本，重复离心，反复多次。最后将上清液吸除，用吸管吸出沉淀物。如果沉淀物太少，最好选取尖底离心管。

（3）红细胞过多：离心后吸取上层沉淀物，放入15ml乙醇冰醋酸液（25%乙醇95ml＋冰醋酸5ml）内，打匀，再离心沉淀。若离心后仍然是血性沉淀物且量较多，可再重复溶血步骤直至沉淀物为非血性。然后，吸取沉淀物。另一种溶血方法：样本离心沉淀后加15ml生理盐水振荡混合，再加入50%乙醇充分振荡混合、离心沉淀。若沉淀物仍可见血性，重复上述步骤，直至沉淀物为非血性，然后吸取沉淀物。

（4）胶冻样液体：去除上清液后加入50%乙醇15ml，再次振荡混合、离心沉淀（胶冻样体腔液为渗出液，富含纤维、蛋白，久置可凝固。多见于结核等良性疾病，也见于黏液腺癌）。

4．涂片

（1）将吸取的沉淀物滴在玻片上，采用两张载玻片对拉、吸管侧壁平推或用另一张玻片推片（玻片间推片夹角为5°～10°）的方法涂片。操作的关键点：吸取的沉淀物内尽量少带水分；涂片手法轻巧匀称，涂出的片子平整，厚薄适当；当沉淀物量少时，涂片面积尽可能小而集中，以利于阅片，不易漏诊。稍微干燥后立即浸入95%乙醇固定。或将沉淀物移入装有保存液的液基样本瓶内，充分振荡，待机器制片。

（2）将残余样本加适量固定液放入冰箱4℃冷藏保存1周，根据细胞学初诊意见，决定是否需要重复制片或用于其他检查。如细胞形态提示淋巴瘤，则尽量确保剩余样本可供流式细胞学检查。若细胞量多，则可离心涂片做巴氏或HE染色。