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分子病理学研究标本

时间:2022-03-13 理论教育 版权反馈
【摘要】:分子病理学是依赖分子生物学技术的应用近年迅速发展起来的一个分支,常应用于某些疾病的基因诊断、靶向治疗的基因筛查等,更是目前研究领域不可缺少的手段。不同的分子生物学方法对标本有不同的要求,可用于分子病理学检测的标本一般包括石蜡包埋组织块、新鲜冷冻组织和细胞三大类。

分子病理学是依赖分子生物学技术的应用近年迅速发展起来的一个分支,常应用于某些疾病的基因诊断、靶向治疗的基因筛查等,更是目前研究领域不可缺少的手段。不同的分子生物学方法对标本有不同的要求,可用于分子病理学检测的标本一般包括石蜡包埋组织块、新鲜冷冻组织和细胞三大类。

【处理方法】 常用的几种标本处理方法简单介绍如下。

1.石蜡包埋法 取材方法见前述,切片制备见石蜡切片制备相关章节,但需注意切片的处理需按分子生物学操作规则的要求,注意工作环境、用具等避免RNA酶的污染

2.速冻法 选择手术切除后30min内无污染的新鲜组织,按实验要求选取的组织立即放入事先准备好的EP管中做好标记,立即粉碎,并按分子生物学的操作程序提取DNA或RNA。若不能当时提取的应将所取组织立即置于-180℃液氮中速冻(或保存),后迅速移至-80℃低温冰箱内保存备用(也可直接保存在-80℃低温冰箱内)。

3.细胞标本 最常用的是细胞培养标本。收集培养的细胞在相应的容器内立即进行实验操作或冻存备用。

【注意事项】

(1)所用刀片、EP管等取材工具均经高温高压消毒、无RNA酶处理。

(2)取材环境相对无污染。

(3)肿瘤标本取材过程中避开边界和出血坏死区,直接取肿瘤实质部分。

(4)取材大小要合适,一般为50~100g。

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