内皮细胞出芽

在细胞迁移过程中，VEGF、bFGF、PDGF、TGF－β、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）、白介素－8（IL－8）、TNF－α等起到促进作用。细胞－细胞外间质的黏附作用对内皮细胞出芽很关键，进入基质的纤维蛋白可能通过其结构中的精氨酸－甘氨酸－天门冬氨酸（Arg－Gly－Asp，RGD）序列对血管内皮细胞的黏附和迁移提供支持面。具有RGD序列的其他血浆蛋白如纤维连接蛋白、玻璃体结合蛋白等可能也有类似的作用。内皮细胞通过细胞－细胞外间质的黏附作用侵入血管周围间质，又通过细胞－细胞的黏附作用促进血管条索的形成。整合素（integrin）是介导细胞与细胞外间质黏附作用的主要因子。整合素是一个膜受体家族，不仅参与细胞与基质、细胞与细胞之间的黏附，而且还介导细胞的生长发育、增殖分化及细胞凋亡。已发现许多整合素均可识别配体中的一些短线状氨基酸序列，其中最具有特征性的结构就是RGD三肽序列。含RGD序列的基质蛋白能与整合素受体相结合并将细胞外信息传入细胞内，引起细胞发生一系列病理生理变化，最近还发现含RGD序列肽能以非整合素受体依赖模式直接作用于细胞。基质蛋白含有多种整合素识别位点，均由几个或几十个氨基酸残基构成，如RGD、DGEA、EIDV、GPRP等短肽序列。RGD三肽序列是其中最具有特征性的结构，它是各种基质中最常见的基本结构成分，也是广泛存在于细胞间识别系统的基本单位。目前已知含有RGD序列的基质蛋白有层黏连蛋白、玻璃体结合蛋白、胶原、血小板反应素（thrombspondin）、骨桥蛋白（osteopontin）、骨涎蛋白（bone sialoprotein）、蝮蝰血抑环肽（echistain）、肌腱蛋白X（tenascin－x）等。能识别RGD序列的整合素有α2β1、α3β1、α5β1、αⅤβ1、αⅡbβ3、αⅤβ3、αⅤβ5等。基质蛋白RGD序列与整合素的结合受多种因素调控，这是因为整合素上的配体识别位点是隐蔽的，只有活化后才得以暴露。在正常情况下，RGD序列也是隐蔽的，只有组织发生炎症或受到肿瘤侵袭时，基质蛋白发生水解，RGD序列暴露才得以与相应受体结合。迄今为止，已发现至少有8种整合素表达于内皮细胞 ，包括α1β1、α2β1、α3β1、α5β1、α6β1、α6β4、αⅤβ3、αⅤβ5整合素。在体外实验和体内实验中，α1β1、α2β1、αⅤβ3、αⅤβ5整合素均影响血管生成。整合素表达于血管内皮细胞的有腔和无腔面，介导内皮细胞的迁移和毛细血管管腔的形成，其中αⅤβ3、αⅤβ5的作用尤为重要。整合素αⅤβ3控制了血管内皮细胞的很多功能，它能促进血管内皮细胞生长和增殖，而其拮抗剂能促使血管内皮细胞凋亡。αⅤβ3还能降低细胞内p53的活性，从而促进血管形成。增殖性的血管内皮细胞比静止性的血管内皮细胞αⅤβ3整合素表达增加。细胞因子bFGF可能是通过调节整合素活性，特别是αⅤβ3的活性而提高人血管内皮细胞的黏附能力。抗整合素αⅤβ3抗体能抑制由bFGF刺激形成的鼠角膜新生血管，而对VEGF刺激的血管形成没有影响。VEGF启动的血管生成依赖于αⅤβ5通路，可被抗αⅤβ5整合素的单克隆抗体所抑制。研究提示αⅤβ3和αⅤβ5不仅是血管新生所必需，也可能限制血管新生，整合素封闭剂的实际作用是活化整合素，激活整合素介导的死亡通路，从而抑制血管新生。bFGF可促进内皮细胞整合素β1链的表达，而整合素β1亚单位的140～160位氨基酸残基也是RGD肽识别位点。EGF受体也可以直接影响整合素的表达、结构和功能。