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苏丹黑染色(

时间:2022-06-24 百科知识 版权反馈
【摘要】:A液:0.3g苏丹黑B溶于100ml无水乙醇中,振荡溶解后过滤。置苏丹黑B乙醇溶液中37℃温箱1~2h。浸入70%乙醇中充分脱色10min,晾干。原始及幼单核细胞SBB呈阴性或弱阳性,阳性物颗粒细小,散在分布于细胞质与细胞核上。Auer小体表现强的嗜苏丹黑B染色。

1.原理 苏丹黑B可溶解于细胞质内的含脂结构中,胞质中的中性脂肪、磷脂胆固醇等脂类染色呈棕黑色或深黑色颗粒,定位于胞质中。

2.试剂配制

(1)固定液:甲醛蒸气。

(2)苏丹黑B乙醇溶液。

A液:0.3g苏丹黑B溶于100ml无水乙醇中,振荡溶解后过滤。B液:16g结晶酚溶于30ml无水乙醇中,和100ml0.3%Na2HPO4·12H2O混匀。

使用时,A液∶B液为3∶2混合,过滤。

(3)0.2%核固红复染液:0.2g核固红放入10%硫酸铝[AL2(SO4)3·18H2O]100ml中,混匀,置37℃水浴加温1h,时时振荡,使其充分溶解,过滤备用。

3.操作步骤 将新鲜干燥涂片放入甲醛蒸气中,固定5~10min。先自来水冲洗,后蒸馏水冲洗,晾干。置苏丹黑B乙醇溶液中37℃温箱1~2h。浸入70%乙醇中充分脱色10min,晾干。放入0.2%核固红复染液中20min,水洗,晾干。镜检。

4.结果判断 阳性结果为胞质中出现棕黑色或深黑色颗粒。

5.临床意义 各阶段淋巴细胞SBB染色均呈阴性反应。国内外均有报道急性淋巴细胞白血病(ALL)SBB染色可见阳性,1984年Stass SA报道350例ALL有6例阳性,占1.6%,4例为L1、2例为L2,SBB阳性率>5%,最高64%,而MPO和NASDCE均为阴性。分化不好原始粒细胞SBB阴性,分化较好原始粒细胞在核周Golgi器开始出现弱阳性反应,阳性物颗粒粗大聚集浓缩;早幼粒及下阶段粒细胞SBB为阳性,阳性强度(+++~++++)。异常中幼粒细胞SBB阳性物充满胞质,呈强阳性反应,部分阳性物在细胞核的凹陷处,呈团块状反应;APL的SBB反应最强,强度为(+++)~(++++)。

原始及幼单核细胞SBB呈阴性或弱阳性,阳性物颗粒细小,散在分布于细胞质与细胞核上。Auer小体表现强的嗜苏丹黑B染色。原红及幼红细胞SBB呈阴性,但在红系增高的AL中,少数原始、早幼及中幼红细胞可见SBB颗粒。原始、幼稚巨核细胞、浆细胞、高雪细胞、尼门匹克细胞和组织嗜碱细胞SBB呈阴性。海兰细胞和网状细胞SBB阴性或阳性。

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