影响抗原抗体反应的因素

三、影响抗原抗体反应的因素

影响抗原抗体反应的因素很多，归纳起来主要有两个方面：一是抗原抗体本身的因素，另一方面是环境因素。

（一）反应物自身因素

在抗原抗体反应中，抗原和抗体是主体，所以它们的特性直接影响反应的结果。

1.抗原　抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目等均可影响抗原抗体反应的结果。例如颗粒性抗原与相应的抗体反应后出现凝集现象；可溶性抗原与相应的抗体反应后出现沉淀现象；单价抗原与相应的抗体反应后不出现肉眼可见现象。

2.抗体　抗体对抗原抗体反应的影响主要有以下三个方面：

（1）来源　不同动物来源的免疫血清，其反应性存在差异。家兔等大多数动物的免疫血清，由于具有较宽的等价带，与相应抗原结合易出现可见的抗原抗体复合物；而马和人的免疫血清等价带窄，抗原不足或过剩，均易形成小分子可溶性复合物。

（2）浓度　抗体的浓度是相对于抗原而言的，二者浓度合适时才易出现可见的反应结果，所以在试验前应先进行预试验，滴定抗原抗体最佳反应浓度。

（3）特异性与亲和力　特异性与亲和力是影响抗原抗体反应的关键因素，它们共同影响试验结果的准确度。

（二）环境条件

1.电解质　抗原与抗体发生结合后，由亲水胶体变为疏水胶体的过程中必须有电解质参与，使抗原抗体复合物表面进一步失去电荷，水化层破坏，复合物相互靠拢聚集，形成大块的凝集或沉淀物。若无电解质存在，则不出现可见反应。常用0.85％氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液和反应液。电解质的浓度不宜过高，否则会出现盐析现象（假阳性）。

2.酸碱度　蛋白质具有两性电离性质，因此每种蛋白质都有固定的等电点。抗原抗体反应必须在合适的pH环境中进行，PH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质。抗原抗体反应一般在pH为6～9之间的环境中进行。当pH达到或接近颗粒性抗原的等电点时，即使无相应抗体存在，也会引起抗原非特异性的凝集（自凝），造成假阳性结果。

3.温度　抗原抗体反应必须在合适的温度下进行，一般以15～40℃为宜，最佳反应温度为37℃。温度升高可加速分子运动，抗原与抗体碰撞机会增多，反应加速。若温度高于56℃时，可导致已结合的抗原抗体复合物解离，甚至变性或破坏。温度越低，结合速度越慢，但结合牢固，更易于观察。某些特殊的抗原抗体反应，对温度有一些特殊的要求，例如冷凝集素在4℃左右与红细胞结合最好，20℃以上反而解离。

此外，适当振荡和搅拌也能促进抗原抗体分子的接触，加速反应，其作用与反应物粒子大小成正比。