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检测器的选择

时间:2022-04-24 理论教育 版权反馈
【摘要】:在体内药物分析的实际工作中,检测器的选择应考虑待测样品的理化性质、分析目的与实验要求、实验室自身条件等诸多因素。使用光电二极管阵列检测器时也应注意所用流动相的截止波长须小于检测波长。除紫外检测器、荧光检测器外,结合样品分析的实际需求,示差折光检测器、电化学检测器、化学发光检测器等也在体内药物分析领域广泛应用。

HPLC中常用检测器的原理与特点已在本章“4.2.7检测器”中进行了简单的介绍。在体内药物分析的实际工作中,检测器的选择应考虑待测样品的理化性质、分析目的与实验要求、实验室自身条件等诸多因素。基于待测样品的理化性质选择适合分析需求且高效灵敏的检测器至关重要。例如,大部分常见有机化合物及部分无机物质都具有紫外或可见光吸收基团,因此采用紫外吸收检测器可对大部分物质具有较好的分析效果。为了得到较高的灵敏度,通常选择被测物质能产生最大吸收的波长作为检测器,但应注意尽可能使用在所选检测波长下没有背景吸收的流动相,即紫外检测器的工作波长要大于所选流动相的截止波长。在某些特殊情况下(如杂质干扰等),也可适当牺牲检测灵敏度而选择吸收稍弱的波长。在实际工作中,分析工作者通常考虑如下两点以选择紫外检测波长:①待测组分在所选波长处有较大吸收(往往不是最大吸收);②与待测物质同时经过检测器流通池的其他物质(流动相、样品溶剂、样品杂质、干扰物质等)在所选波长下无吸收或有较小吸收。当同时检测多种物质时,还要兼顾多种物质的最大吸收波长,以选择一个合适的波长使待测组分的检测限和灵敏度均达到合适的分析要求。

当被测样品组分的最大吸收波长未知,或多种被测组分的吸收波长范围较宽时,可以考虑采用光电二极管阵列检测器,通过全波长扫描,使样品中所有组分全部可以通过检测器,从而对样品波长吸收信号进行分析。使用光电二极管阵列检测器时也应注意所用流动相的截止波长须小于检测波长。

对于能产生荧光的物质,荧光检测是一种较好的选择,甚至在实际工作中,很多分析工作者通过化学衍生化生成荧光衍生物,再进行荧光检测。这种方法之所以受到分析工作者的青睐,是因为荧光检比紫外检测器的灵敏度高1~2个数量级,最小检测浓度可达0.1 ng·mL-1,适用于痕量分析。

除紫外检测器、荧光检测器外,结合样品分析的实际需求,示差折光检测器、电化学检测器、化学发光检测器等也在体内药物分析领域广泛应用。各种检测器的性能概况如表4-4所示。

目前,随着质谱技术的蓬勃发展,其与高效液相色谱联用形成的液质联用技术在体内药物分析工作中发挥着重要作用,关于液相色谱-质谱联用技术的发展与应用将在相关章节进行详细的介绍,这里不再赘述。

表4-4 HPLC常用检测器性能比较

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