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促肾上腺皮质激素释放激素测定

时间:2022-04-20 理论教育 版权反馈
【摘要】:1981年从羊的下丘脑分离出一个41肽的结构,目前多数人认为,它并非是唯一的促肾上腺皮质激素释放激素。促肾上腺皮质激素的分泌可能受多因素调节,除CRH 41还有血管升压素、去甲肾上腺素等。CRH 41的主要作用是促进垂体分泌和合成ACTH,在生物体内、外皆有此作用。垂体ACTH细胞膜上已证明有CRH 41的受体。脑室注入CRH引起交感神经活性增高、儿茶酚胺分泌增加、血压及心率升高。颜色的深浅和样品中CRH的浓度呈比例关系。

一、概 述

1981年从羊的下丘脑分离出一个41肽的结构(CRH 41),目前多数人认为,它并非是唯一的促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone CRH)。促肾上腺皮质激素(ACTH)的分泌可能受多因素调节,除CRH 41还有血管升压素(VP)、去甲肾上腺素(NE)等。

CRH 41的主要作用是促进垂体分泌和合成ACTH,在生物体内、外皆有此作用。垂体ACTH细胞膜上已证明有CRH 41的受体。脑室注入CRH引起交感神经活性增高、儿茶酚胺分泌增加、血压心率升高。

二、标本采集

1.采集时间 采集静脉血标本,普通试管或用EDTA、肝素作为抗凝剂的管中,普通试管2h内送检,抗凝管尽快送检。

2.标本保存

(1)血清 全血标本请于室温放置2h或4℃过夜后于1000xg离心20min,取上血清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

(2)血浆 收到标本后尽快于2~8°C 1000 xg离心15min,在室温下(20~25℃)可放置11~18h,在4~8℃可放置1~2d,长期保存只能在-20℃或-80℃,但应避免反复冻融。

(3)其他生物标本 于1000 xg离心20min,取上清液即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

样本稀释:血清或血浆标本推荐稀释5000倍。

三、注意事项

以上标本置4℃保存应<1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月, -80℃不应超过2个月;标本溶血会影响最后检测结果,因此,溶血标本不宜进行此项检测。

四、试验方法

酶联免疫吸附试验:固相夹心法酶联免疫吸附试验,已知CRH浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将CRH和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用,产生颜色。颜色的深浅和样品中CRH的浓度呈比例关系。

五、临床意义

升高见于妊娠、早产儿、胎儿;且妊娠最后3个月比早期3个月显著升高;而腹部大手术患者,在术后1d浓度明显升高,在第2天后又开始下降。

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