【摘要】：在用ABI PRISM 310遗传分析仪作STR分型时，matrix文件用来消除正常范围内的不同荧光之间的干扰。而matrix文件对于仪器及电泳条件是特定的。因此，首次使用仪器或者更换电泳缓冲液时，应新建matrix文件，以消除不同颜色间的重叠。1．杂合等位基因峰高和面积的不对称正常情况下，杂合子的2个等位基因的峰值一致或接近，小峰的面积（或峰高）在大峰的70%以上。违反这种规律时，需要仔细检查或重新检测。Stutter峰的峰高或峰面积不超过其主峰的15%。
六、STR分型的影响因素及问题
（一）STR分型的影响因素
在用ABI PRISM 310遗传分析仪作STR分型时，matrix文件用来消除正常范围内的不同荧光之间的干扰。标记DNA片段的荧光素在激光激发下发出荧光，但在某些荧光素之间会发生一些吸收光谱的重叠。例如，蓝色荧光素和绿色荧光素间会有部分重叠，matrix文件则可以消除这种现象。而matrix文件对于仪器及电泳条件是特定的。因此，首次使用仪器或者更换电泳缓冲液时，应新建matrix文件，以消除不同颜色间的重叠。
（二）分析STR分型结果应注意的问题
1．杂合等位基因峰高和面积的不对称正常情况下，杂合子的2个等位基因的峰值一致或接近，小峰的面积（或峰高）在大峰的70%以上。违反这种规律时，需要仔细检查或重新检测。
2．额外峰正常的纯合子只有1个峰，杂合子有2个峰。如果出现第3个峰，则称额外峰。最常见的额外峰是Stutter峰，出现在比其主峰（目的等位基因）少1个或多1个重复单位的位置。其形成原因一般认为是在PCR过程中聚合酶出现复制滑脱。Stutter峰的峰高或峰面积不超过其主峰的15%。其峰高与重复单位长度呈反比（即五核苷酸重复单位＜四核苷酸重复单位＜三核苷酸重复单位＜二核苷酸重复单位）。不同基因座产生的Stutter峰大小不同，同一基因座内片段大的等位基因的Stutter峰值比片段小的要大些。
（胡 兰 伍新尧）
免责声明：以上内容源自网络，版权归原作者所有，如有侵犯您的原创版权请告知，我们将尽快删除相关内容。
