（一）免疫学测定法
免疫学检测法是建立在抗原抗体反应基础上的免疫化学分析技术。细胞因子的化学本质是蛋白质或多肽，因此很容易制备相应的细胞因子抗体（多克隆抗体和单克隆抗体），用已知的抗体便可以检测未知的细胞因子（抗原）含量。常见的方法有ELISA和放射免疫测定（RIA）。免疫学检测法可用于检测体液标本中的细胞因子，也可以检测细胞内的细胞因子。
（二）生物学测定法
细胞因子生物学检测法是根据某些细胞因子特定的生物学功能设计的，因此该方法是测定细胞因子生物活性的方法。其原理是应用一定的指示系统（如细胞）与已知活性的细胞因子标准品或未知活性的待测标本相互作用，最终以指示系统的变化（如细胞增殖、凋亡或分泌蛋白等）来显示细胞因子的功能，将待检标本与标准品进行比较最终得知待检标本的细胞因子水平。
以检测IL-2为例，生物学测定法的原理如下：采用依赖IL-2增殖的细胞（依赖细胞株）作为指示细胞；将不同浓度的IL-2（标准品或待测样品）与指示细胞共同孵育一定的时间，指示细胞的增殖情况与IL-2活性成正比；待测样品中细胞因子的活性通过与标准品的活性比较而获得。生物学检测方法具有较高的灵敏度，不需商品化试剂盒，成本低。
（三）单个细胞分泌细胞因子的检测
酶联免疫斑点试验（enzyme-linked immunospot assay，ELISPOT）原理是：先将抗细胞因子抗体包被固相载体，再加入不同来源的细胞，待细胞分泌细胞因子后洗去细胞，然后加入相应的酶标抗细胞因子抗体，即可借助底物显色反应的深浅测定结合在固相载体上的细胞因子量，并可在光镜下观察分泌细胞因子的细胞。
（四）细胞内细胞因子的测定
采用流式细胞术（FCM）免疫荧光技术可从单细胞水平检测不同细胞中的细胞因子，采用不同颜色荧光素标记的抗体可在同一个细胞内同时测定几种不同的细胞因子。也可同时加入不同颜色荧光素标记的抗细胞表面分子的单抗，与细胞作用后，同时分析表达细胞因子的细胞类型。
（张晓姝）
【思考题】
1．简述抗原抗体反应的特点。
2．简述凝集反应、沉淀反应、补体结合反应的原理、常用的方法及临床应用。
3．何谓免疫标记技术，常用的方法有几种？
4．如何从外周血中分离淋巴细胞？简述其原理和方法。
5．如何检测淋巴细胞的增殖？
6．如何检测分泌性的和细胞内表达的细胞因子？分别简述其实验原理。
［1］李殿俊，朱道银．免疫学检测技术的基本原理．见：金伯泉主编．医学免疫学．第5版．北京：人民卫生出版社，2008：229-240
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