南瓜种质资源收集工作

三、南瓜种质资源收集工作

（一）收集种质资源的方法收集种质资源的方法有四种，即直接考察收集、征集、交换、转引。征集种质资源在市场经济条件下已经变得比较困难，主要是考察收集、交换与转引。

1．考察收集有计划地组织到国内外进行考察、采集，多用于收集野生近缘种、原始栽培类型与地方品种，是收集品种资源的主要途径。在考察收集上要注意：①南瓜表现不同的地方，如熟期早晚、抗病虫害程度等。②地理生态环境不同的地方，如地形、地势和气候、土壤类型等。③农业技术条件不同的地方，如灌溉、施肥、耕作、栽培与收获、脱粒方面的习惯不同。④社会条件，如务农和游牧等不同。

（1）取样。能充分代表收集地的遗传变异性，在条件允许的情况下至少要从20～30株上各取几粒种子，实际可能只收集到少量或几粒种子。

（2）记录。采集资源时，在种质资源登记本上详细记录，包括：①采集者的编号：用采集者的姓名或姓名的第一字母构成；②主持收集单位或个人名称；③采集日期；④采集地点；⑤品种或类型名称；⑥产地的自然、耕作、栽培条件经度、纬度、海拔、种植季节、灌溉等分别用1、2、3、4、5、6、7、8表示；⑦资源来源：分别用1、2、3、4、5、6、7、8表示来源于荒野、农田、农庄储存、农村庭院、乡镇集市、商场、研究单位及其他；⑧资源情况：分别用1、2、3、4、5、6表示野生种、野草、育种者品系、原始栽培种或地方种、育成品种或其他；⑨资源的主要形态特征生物学和经济学性状，附照片；⑩种植者或消费者反映等。

（3）建档。资源收集好后要及时建档，包括种子实物档案、文字资料档案、影像资料等。种子实物应按照不同要求妥善贮存。种子实物应付文字资料档案，包括：种质资源登记本、检索卡和资料档案。检索卡包括种质材料的编号顺序、名称、原产地和分类等项目，编号依据国家种质资源三级编码方法（见本节种质资源整理），名称按字母（拉丁文）或笔画顺序排列，标明原产地和所属科、属、种、亚种、变种、品种等。影像资料包括照片、视频、幻灯等，按顺序编码存放。资源档案资料可输入计算机采用数据库管理，从而更方便、有效的进行资源管理。

2.交换与转引也是种质资源收集的重要方式。我国南瓜种质资源丰富，应在着重收集本国的种质资源的基础上，也注意发展对外的种质交换、引种。交换与转引也应做好记录工作，包括：来源、名称、主要经济性状、生育期、抗性等；在从国外引进资源时注意检疫。

（二）种质资源的整理收集到的南瓜种质资源应及时整理。包括如下步骤：

1.整理归类收集到的种质资源，应及时整理。首先将样本对照现场记录，进行初步整理归类，将同种异名者归类，以减少重复。将同名异种者分开，订正错误。并科学的登记和编号。如美国把国外引进的种子材料，由植物引种办公室负责登记，统一编为P．L号（plant introduction)。前苏联的种质资源登记编号由全苏作物栽培研究所负责，编为K字号。中国农科院国家种质库对种质资源的编号办法为三级分类编码。方法如下：①将作物划分成若干大小类。Ⅰ代表农作物，Ⅱ代表蔬菜；Ⅲ代表绿肥、牧草；Ⅳ代表园林、花卉。②各大类作物又分成若干类，用阿拉伯数字表示，如1代表禾谷类作物；2代表豆类作物；3代表纤维作物；4代表油料作物；5代表烟草作物；6代表糖料作物。③具体作物编号用大写英文字母表示。lA代表水稻；1B代表小麦；IC代表黑麦；2A代表大豆等。④品种编号用五位阿拉伯数字表示。lA00001代表水稻某个品种；lB0006代表小麦某个品种；lC00001代表黑麦某个品种等。

广东蔬菜种质资源编目为：编号原则是在国家蔬菜种质资源三级分类编码基础上，根据广东现有蔬菜作物的种类，作相应的调整以简化编码表，采用三级代码便将某一份种质的编号归属准确地表达出来。用01，02，03…代表蔬菜类别；A，B，C，…代表蔬菜种或变种，品种代号设4位数；对同种（变种）蔬菜品种的编号采用了美国国家种质贮藏实验室按种质入库先后编排流水号的方法，以便于实际操作。如G D V09J0006代表广东蔬菜种质资源库苦瓜的第6个品种。

2.系统分类资源材料不仅要整理编码，还要进行简单的分类，确定每份材料所属的植物分类学地位和生态类型，以便对收集材料的亲缘关系、适应性和基本的生育特性有个概括的认识和了解，为保存和做进一步研究提供依据。

（三）南瓜种质资源的保存

1.保存要求必须较长时间保持其生活力，并且保持在比较高的水平（80％～90％），发芽率> 50％；保持其原有的遗传性，防止丢失、变异、混杂，服务方便。

2.保存方法

（1）种植保存。每3～5年种一次，通过种植繁殖种子保存生活力。在种植中注意隔离，采取自交、典型株姐妹交控制授粉，以防生物学混杂。

（2）贮藏保存。南瓜种子和其他作物种子相同，在控制贮藏条件（温度、湿度）以保持品种资源种子的生活力，迫使种子处于代谢作用的最低限度。可在20℃～0℃、含水量8％～6％范围内，按不同要求达到长期、中期、短期贮存标准目的。但是，未成熟、不饱满、损伤的种子，呼吸作用将增强，种子寿命负相关。保存的设施有：

①干燥器：在常温下25℃，可保存3～5年，发芽率仍达85％。

②利用自然条件：在干燥、年均温度低的地区或设施（如地下室、山洞），温度一般在15℃～20℃，放置种子，发芽率可以较长时间保持。

③种质资源库：短期贮藏库温度20℃、湿度45％，种子纸装或在布袋中保存5年；中期贮藏库1℃～4℃、湿度45％，种子放置在密闭的铝盒或玻璃容器内，可保存5～15年；长期贮藏库-10℃、湿度30％，种子放置真空包装的铝盒中，可保存15年以上。

日本农业技术研究所采用干燥种子密封低温二重贮藏法。先将收集到的种子在防疫温室内栽种，以防病虫传播。贮藏前将种子混合，干燥处理，含水量降到6％～8％，然后分装密封（每份300粒)，低温贮藏。一种为-10℃，30年以上极长期贮藏；另一种-1℃，10年以上的长期贮藏。长期贮藏的种子供国内外各育种单位用。当长期贮藏的种子将分发完毕时，可以从极长期贮藏的种子库中取出一部分，再行繁殖，以补充长期贮藏种子的库存量。一般较长期贮藏的种子量为3000粒，可用于10次种子再繁殖。当极长期的种子即将用完而最后一次繁殖时，就要分别补充极长期和长期两类种子的库存量。

3.种质资源入库要求种质资源获得不易，无论是企业种质库，还是国家种质库，都要按照一定程序按部就班入库，妥善保存。入库程序（见图4-1）。

图4-1　南瓜种质资源入库程序

作为种质资源保存的种子数量，南瓜中粒种子（千粒重50～100g）6000粒；大粒种子（千粒重100～400g）2500粒。在贮存期间要做生活力测定，有一定损耗。因此，要增加15％数量。种子装入贮存容器中，立即密封，贴上标签，标签上注明材料名称、种子量、入库时间等，种子存放位置可用如下方法编号：A010201，A为冷库编号，01架子排号，02架子层号，01为种子屉号等。

广东蔬菜种质资源库为种子架，按种子架排、列、层（筐）的顺序进行编号，所编出的每筐编码即为库位号。种质库库位编号方法为：排的编码顺序由南（库门）至北，标以A，B，…，H；列的编码顺序由外往内，标以1，2，3，4；筐（层）的编码顺序从下往上，标以01，02，…，12。依此编出每一筐的库位号，每筐的库位号由一个字母及3位数字组成。如B-2-08，代表广东蔬菜种质资源库的B排第2列第08筐种子。通过库位号，就可以很容易地找出库内所保存的每一份种子的位置。

在企业种质库保存种子时，种子数量可根据情况酌减，原则要求每份种质保存数量在1000粒以上，最少500粒。

（四）种质资源的研究和利用收集来的南瓜种质资源性状多样、遗传复杂，只有通过研究整理，才能正确认识并有效利用。种质资源研究的内容有：资源特征特性研究、遗传特性研究评价以及细胞学研究等。在开展鉴定研究时，先在一般的相对一致的土地条件下栽培，考察资源的生育期，各种形态形状、对病虫害以及不利气候、土壤条件的反应等，对各种性状有统一明确的记载考察。

1.品种资源特征、特性的观察和鉴定在田间条件下观察品种资源的植物学特征和农艺性状及生育特性。所选项目主要依据南瓜育种的实际需要，如与育种密切相关的生育期、熟性、果实形态、产量性状（单瓜产籽量、种子特性）、抗性等，同时兼顾植物学分类性状等。其中生育期性状有播种期、出苗期、定植期、开花期、种瓜采收期；熟性有第一雌花节位、第一瓜节位等；果实形态包括单果重、果长、果宽、果形、果棱有无、果棱色、果表皮色、果表皮斑纹、果肉厚、肉质、风味等；产量性状包括蔓型、叶型、单瓜重、单瓜籽粒数、千粒重、籽粒色、饱满度等；抗性包括耐寒性、耐热性、耐盐碱性及对霜霉病、白粉病的抗性等。

2.遗传特点的研究和分析种质资源的研究不能局限于形态特征、特性的观察鉴定，而要深入研究其主要目标性状的遗传特点，特别是深入研究主要经济性状的遗传变异规律，才能有的放矢地选用种质资源。每个种质资源是处于遗传平衡状态的同质结合的种质群体，遗传基础相对较窄。为了丰富种质群体的遗传基础，种质资源通过杂交、诱变及其他手段可以创造新的种质。如无壳南瓜的种质资源工作者利用1份美国杂交种、1份国内无壳F1、7份未稳定美国材料及来自欧洲不同国家和地区的多份材料，通过不同资源间杂交、聚合杂交、综合杂交技术、卫星搭载，创造出了亲缘关系不同的自交系类群11个，性状稳定自交系2743个，无壳南瓜基因库（gene pool)扩大了上百倍，为新品种的选育奠定了基础。