黄腐酸和羟丙基-β-环糊精对阿司匹林分解的影响比较

Mohammad Khalid Anwer1,2, Suraj Prakash Agarwal1, Asgar Ali1 and Yasmin Sultana1 著

崔佳丽3 刘建珍3 游金坤3 李 鹏3 李宝才3译

（1 药学院药物制剂教研室 新德里 印度

2 沙特国王大学药学院药物制剂教研室 利雅得 沙特阿拉伯王国

3 昆明理工大学生命科学与技术学院 昆明 650224）

摘 要：研究了黄腐酸(FA)作为一种的新的络合剂，与羟丙基-β-环糊精络合物(Hp-β-CD)相比，对阿司匹林(ASA)分解的影响。ASA与FA以1∶0.5、1∶1、1∶2(物质的量比)络合，并用冷冻干燥、溶剂蒸发和喷雾干燥三种方法进行干燥。ASA-羟丙基-β-环糊精(1∶1)络合物通过喷雾干燥制备，并与最佳FA络合物进行比较。将所有的络合物和ASA放入贴好标签的铝塑小包中密封，在温度为40±2 ℃、相对湿度为75%±5%的稳定暗箱中存放120 d。分别在0、30 d、60 d、90 d和120 d分析各样品的水杨酸含量。以物质的量比为1∶1进行络合的ASA-FA喷雾干燥络合物中水杨酸含量为4.31%，该络合物在所有不同制备方法的络合物中具有最佳稳定性。然而，1∶1的ASA-羟丙基-β-环糊精喷雾干燥络合物中测得水杨酸含量只有2.35%。与FA相比，ASA与羟丙基-β-环糊精络合，其稳定性更强。为提高阿司匹林的稳定性，对一种新型FA络合剂进行了研究。与1∶1 ASA-FA喷雾干燥络合物相比，ASA与羟丙基-β-环糊精1∶1络合时，ASA的稳定性有显著改善。

关键词：阿司匹林 络合作用 黄腐酸 羟丙基-β-环糊精 斯拉洁特 稳定性

Influence of Fulvic Acid and Hydroxyl Propyl-β-cyclodextrin on Aspirin Degradation

Mohammad Khalid Anwer1,2, Suraj Prakash Agarwal1, Asgar Ali1, Yasmin Sultana1 write

Cui Jiali3, Liu Jianzhen3, You Jinkun3, Li Peng3, Li Baocai3 translate

(1 Department of Pharmaceutics, Faculty of Pharmacy, New Delhi, India

2 Department of Pharmaceutics, College of Pharmacy, King Saud University, Riyadh, Kingdom of Saudi Arabia

3 Kunming University of Science and Technology, Kunming, 650224)

Abstract: Objective: The degradation of aspirin (ASA) was investigated to reveal information about the influence of complexation with fulvic acid (FA), as a new complexing agent and compared with hydroxy propyl-β-cyclodextrin complex. Materials and methods: ASA was complexed with FA in the molar ratio 1:0.5, 1:1, and 1:2 by different methods through lyophilization, solvent evaporation, and spray drying. Spray-dried(1:1) ASA–hydroxy propyl-β-cyclodextrin complex was prepared and compared with optimized complex of FA. All the complexes and ASA alone were packaged in well-labeled sealed polythene-lined aluminum pouches and stored in stability chamber at 40 ± 2 °C and 75 ± 5 % relative humidity for 120 days. Samples were analyzed for salicylic acid content at 0, 30, 60, 90, and 120 days. Results: Overall 4.31% salicylic acid was formed in 1:1 ASA–FA spray-dried complex, which was optimized stable complex among other complexes of FA prepared by different methods in different molar ratios. However, 2.35% salicylic acid was measured with 1:1 spray-dried ASA–hydroxy propyl-β-cyclodextrin complex. Stability of ASA increased more when complexed with hydroxy propyl-β-cyclodextrin as compared to FA. Conclusions: A novel complexing agent in the form of FA was investigated to increase the stability of ASA. A marked improvement in stability of ASA was observed when complexed with hydroxy propyl-β-cyclodextrin (1:1) by spray drying as compared to 1:1 spray-dried ASA–FA complex.

Key words: Aspirin; complexation; fulvic acid; hydroxy propyl-b-cyclodextrin; shilajit; stability

阿司匹林(ASA)是一种非常古老的药物，至今仍具有良好的药用价值，ASA分子中含有羧基和酯基。酯基易水解，导致药效降低，对人体胃肠道产生副作用。如何抑制ASA水解是一个亟待解决的问题。许多文献都报道过ASA的水解。在水分存在的情况下，ASA易分解为水杨酸和乙酸。研究发现，与ASA单药相比，ASA-环糊精络合物贮存六个月才出现明显分解。另一项研究表明，纤维素粉的结晶度指数对ASA的分解有影响，较低结晶度指数的纤维素粉表现较低的ASA分解率。ASA的分解随着赋形剂比表面积的增加而增加(无水磷酸氢二钙粉)。

斯拉洁特(一种印度传统药，相当于我国的乌金石)是世界上很多山脉岩层中存在的一类浅褐色到黑褐色的浸出物(特别是印度次大陆的喜马拉雅山脉)。其治疗作用在古书中已有记载。研究发现斯拉洁特主要由腐植酸类物质[腐植酸和黄腐酸(fulvic acid，简称FA)]组成，其中FA为主要成分，FA结构灵活易变，有很多直径大小不同的空腔存在。据推测，FA空腔中的植物次级代谢产物对常见的化学和生物降解具有一定的抑制作用，这些化合物可能松散地连接在斯拉洁特的核心结构上。据此，本文研究了FA作为新型络合剂能够提高ASA稳定性的潜在性能。FA在ASA周围形成保护层，尽可能将水分隔绝，降低ASA分解。

1 材料与方法

ASA由Sigma Aldrich(印度，新德里)提供。斯拉洁特样品由Dabur研究基金会赠予(印度，加济阿巴德)。羟丙基-β-环糊精购买自Sigma Aldrich。参照Ghosal S.(1989)的方法提取FA，并对该方法做了轻微调整。用极性逐渐增加的热有机溶剂(氯仿、乙酸乙酯和乙醇)对斯拉洁特细粉进行萃取以去除其中的生物活性组分。残渣在氮气保护下用0.1 mol/L NaOH溶液溶解，振荡、过滤，将滤液pH调到小于3，使腐植酸沉淀析出。所得滤液中加入大孔型离子交换树脂，不断摇动使黄腐酸充分吸附，然后用0.1 mol/L NaOH溶液解吸。所得黄腐酸钠溶液通过氢型阳离子交换树脂得FA溶液，浓缩，冷冻干燥得无定形FA。以1∶0.5，1∶1和1∶2不同物质的量比(ASA∶FA/ HP-β-CD)的ASA-FA和ASA-羟丙基-β-环糊精络合物分别采用溶剂蒸发、冷冻干燥和喷雾干燥等不同方法进行制备。

将ASA和FA溶于双蒸水中，超声波震荡2 h后得到澄清溶液，溶液在超低温冰箱中保存24 h，置于Lyph-lock装置中冻干12 h。所得无定形粉末置于研钵中研细，过100目筛。得FA均匀粒径细粉。ASA-FA络合物的制备：将所需量的ASA溶于50 mL氯仿，FA溶于100 mL水；不断搅拌下将FA溶液加入ASA溶液中，并超声波震荡2 h；溶液置于在沸水浴中的旋转蒸发仪(科学体系，班加罗尔，印度)中干燥。后将络合物置于烘箱中干燥，收集并过60目筛，储存在真空干燥器中备用。

喷雾干燥ASA-FA络合物的制备：将所需质量的ASA和FA(ASA与FA的摩尔比为1∶0.5，1∶1和1∶2)溶于100 mL重蒸水中，超声波震荡2 h。喷雾干燥优化条件：流量，1.6 mL/min；出口温度，135 ℃；雾化气压，3 kg/cm2。物质的量比1∶1 ASA-HP-β-CD络合物同法制备。

将所有络合物和ASA密封在贴好标签的内衬聚乙烯铝袋中，在温度40±2 ℃、相对湿度75± 5%的暗箱中储存120 d。精确称取18 mg ASA粉末，以及与ASA等当量的络合物粉末置于锥形瓶中，加入100 mL乙醇溶解(180 ug/mL)。将锥形瓶置于声波发生器中剧烈摇动15 min。分别在第0，30 d、60 d、90 d和120 d用HPLC检测样品中水杨酸含量。流动相为水∶甲醇∶冰乙酸(65∶30∶5，v/v)，检测波长为280 nm。

2 结果与讨论

以水杨酸的溶出率为指标，将FA和HP-β-CD络合物在温度40±2 ℃与相对湿度75±5%的条件下观察120 d，对ASA的降解做整体分析。与溶剂蒸发和喷雾干燥FA络合物相比，冷冻干燥的络合物中ASA的分解较多。然而，所有的FA络合物中1∶1喷雾干燥络合物中水杨酸含量最小(4.31%)，该络合物的配比为最佳条件。在同样条件下制备ASA与HP-β-CD络合物，与FA络合物相比，ASA与HP-β-CD络合物具有最大稳定性(120 d后水杨酸含量为2.35%)。结果显示，与ASA单药相比，ASA与FA和HP-β-CD络合之后其稳定性显著增加(图1)。

图1 HP-β-CD与FA络合物中ASA的降解图
Fig.1 Degradation pattern of ASA in HP-β-CD and FA complexes

3 结论

从斯拉洁特中分离出一种能提高ASA稳定性的新型FA络合剂。在冻干的FA络合物中ASA分解较多。这可能是因为ASA部分包埋于FA空腔中。ASA单药在温度40±2 ℃、相对湿度75%±5%的条件下储存120 d分解显著，产生了大量的水杨酸。然而，1∶1 HP-β-CD和FA与ASA的喷雾干燥络合物中ASA的稳定性有显著提高，其中ASA与HP-β-CD 1∶1喷雾干燥络合物稳定性较大。

参考文献(略)

译自：Drug Development and Industrial Pharmacy, 2010，36(4): 428～430。